1. 单色荧光染色图片处理

Step.1 首先安信娱乐要做的就是打开Image J软件。打开以后看看出现的界面，出现图示界面表明软件打开成功。

Step.2 导入安信娱乐实验中产生的荧光染色图片，图片的格式可以是png等多种格式。找到荧光染色图片所在的路径，在所在的文件夹中找到你所需要处理的荧光染色图片。

本次以这篇SCI中的免疫荧光图片为本次处理的示例照片

Step. 3 单色荧光染色图片处理。

操作过程中依次按照以下顺序进行软件操作

Image -> Adjust -> Brightness/Contrast -> 调整Maximum或Minimum的阈值（通常只处理Maximum就可以） -> Apply -> File -> Save/Save as

调整结果：调整完以后的LC3, ATPB以及DAPI图。

2. 未Merge过荧光染色图片处理

Step. 1 打开软件的merge图片处理功能。

可以依次按照以下顺序对多种单个荧光染色免疫荧光图片进行操作 Image -> Color -> Merge Channels

Step. 2 Merge绿色，蓝色和红色三张免疫荧光染色图片。

示例中merge的照片是绿色，蓝色和红色，因此将处理过的“绿色LC3”，“红色AYPB”图片和“蓝色DAPI”图片分别放到相应颜色的通道中，勾选“Keep source images”，点“OK”就可完成merge。PS：完成merge的图片还需要进行保存（Save/Save as）

多色Merge之后的结果：

PS：调整完阈值以后切记、切记、切记点击Apply